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FCS技术国内应用的现状及存在的问题

摘要 FCS(Fluorescence Correlation Spectroscopy,荧光关联光谱)技术是用来研究分子及颗粒等微粒级别物质的结构-功能之间关联的重要技术手段,近年来FCS技术被应用于分子细胞计量学,生物细胞动力学,分子动力学,微流体的研究等多个领域,国内的FCS技术应用有很大的发展。本文综述了目前国内FCS技术的应用状况,从技术设备改进和标准化,数据处理及分析,方法及应用,结果验证及解释等方面,分析了FCS技术在国内应用情况,FP技术所存在的问题,并提出了可采取的改进措施。

FCS技术国内应用的现状及存在的问题

关键词:荧光关联光谱;研究;应用状况;发展

1.引言
FCS(Fluorescence Correlation Spectroscopy,荧光关联光谱)是荧光分析技术的一种,它是利用激发-荧光反应过程中交叉耦合的分子激发-荧光相互作用的时间标度,通过计算激发-荧光时间间隔来测定材料体系被观察对象的量子数及复杂性(Priego et al.,2013)。由于其具有灵敏度高和界面问题少等优点,该技术目前已经广泛应用于分子细胞计量学,生物细胞动力学,分子动力学,微流体的研究等多个领域(Iwadate et al.,2012)。

虽然FCS目前已有多年发展历史,但是在国内应用相对较少,对国内FCS技术应用状况进行综述具有重要的意义,本文从技术设备的改进和标准化,数据处理及分析,方法及应用,结果验证及解释等方面,阐述了国内FCS技术的应用状况,分析了FCS技术所存在的问题及可采取的改进措施,以期为国内FCS技术的发展提供参考。

2、国内FCS技术应用
2.1技术设备改进和标准化
国内FCS技术设备也发展迅猛,包括精密微流控分析仪器、精密反射式拉曼光谱仪、包括FCS和FCCS(Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy)和FCA(Fluorescence Correlation Analysis)的数据采集仪等设备,在性能、操作和维护方面做出了极大的改善,同时,这些仪器都采用了真空瓶,允许在真空条件下实现荧光侦测,并采用强度稳定的LED及装置内部的光稳定系统,以改善抗噪能力及检测准确度,提高实验效率。

另外,值得注意的是,国内目前正在展开一个FCS标准化工作,主要是把FCS在分子细胞计量学和生物细胞动力学研究中更加系统化并开展国家规范性文件发布的工作,以规范国内FCS技术的研究与应用。

2.2数据处理及分析
数据处理及分析工作是进行FCS实验的基础和前提,也是实验结果的关键所在,用来反映微粒级别物质结构-功能之间关联的一个重要指标,其有效完成数据处理和分析是了解FCS实验结果及其影响因素的重要依据。

FcsExpress是英文版FCS数据分析
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