赛默飞世尔科技公司：生物偶联技术手册（72页）.pdf

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1、生物偶联技术手册用于蛋白和多肽的交联、固定、修饰、生物素化和荧光标记的试剂生物偶联是通过化学共价键结合两个或多个分子或生物大分子的过程。该技术利用多种化学试剂进行蛋白和多肽的交联、固定、修饰和标记。生物偶联试剂含有具有反应活性的末端，可与蛋白或其他分子上的特定功能基团（如伯氨基、巯基）反应。蛋白和多肽上有多个功能基团可用于交联，因此蛋白和多肽可以在各种应用中作为靶标，这些应用包括生物素化、固定到固相支持物表面、蛋白质结构研究和代谢标记等。化学试剂可用于修饰蛋白和多肽的氨基酸侧链，改变蛋白或者多肽的电荷、封闭或暴露反应活性位点，使功能基团失活或改变其特性，从而形成用于交联和标记的靶标。交联、标记

2、和修饰试剂可以根据其化学反应活性、分子特征或者应用进行分类（表1）。简介包装选项根据您的反应规模或需求选择包装尺寸或等级。可提供的试剂范围从毫克到千克不等。毫克毫克到克毫克到克克到千克Bulk-sizepackagesavailable单管目录产品Premium（特优级）大容量或定制包装分子特征其次，选择与应用相关的重要功能或特征。功能可切割结构修饰NOOOOONOOOPHOOOHOOHODSS两端反应基团相同DSP具有可切割的二硫键TCEP还原二硫键间隔臂组成间隔臂长度间隔臂结构OONNOOOOONNOOOn=8CA(PEG)8MW 441.51Spacer Arm 33.6n=12CA(P

3、EG)12MW 617.72Spacer Arm 46.8n=24CA(PEG)24MW 1146.35Spacer Arm 89.8OOHONH2nCA(PEG)4MW 265.30Spacer Arm 18.1OOOOOHONH2BMH带有碳氢骨架间隔AMAS 4.4 反应基团的间距CA(PEG)n增加在水溶液中的溶解度表1.选择生物偶联试剂的关键考虑因素。化学反应活性首先，选择可结合目标生物分子功能基团的试剂。NHS酯反应马来酰亚胺反应Sulfhydryl-containingmoleculeMaleimidecompoundThioether bondpH 6.57.5应用根据应用（例

4、如，蛋白质检测、固定或相互作用研究）选择特定试剂。标记固定蛋白质相互作用研究HOOOSHNNHNOOOOONOOONSOOOOONOOOO生物素用于标记和检测DSS将蛋白质偶联到表面DSSO用于质谱，切割型交联剂含氨基的分子NHS酯化合物胺键NHS含巯基的分子马来酰亚胺化合物硫醚键生物偶联试剂的化学反应活性 简介 5与氨基反应的化学基团 6与羧酸反应的化学基团 7与巯基反应的化学基团 8与羰基反应的化学基团 10非特异性反应性的化学基团 12化学选择性连接 13生物偶联试剂的分子特征 简介 14同型双功能和异型双功能交联剂 15一般反应条件 16修饰 16间隔臂长度 18间隔臂组成 18间隔臂

5、可切割性 18间隔臂结构和溶解性 19使用生物偶联试剂的应用 简介 20蛋白和多肽的生物素化 21蛋白和多肽的荧光标记 23将蛋白质固定到固相支持物上 25使用基于PEG的试剂进行表面修饰 26用于抗体制备的半抗原-载体偶联 27蛋白-蛋白偶联 28产生免疫毒素 29标记转移 29亚基交联和蛋白质结构研究 31应用交联质谱研究蛋白质相互作用 32质谱可切割交联剂 33体内交联 34代谢标记 35细胞表面交联 36细胞膜结构研究 36满足生物偶联特定需求的包装 简介 37生物偶联试剂的No-Weigh包装形式 38Premium（特优级）生物偶联试剂 39生物偶联资源 40词汇表 42参考文献

6、44订购信息 50相关手册和资源 71目录5生物偶联试剂的化学反应活性简介生物偶联试剂最重要的特征是其化学反应基团，反应基团是化学修饰方法和机制建立的基础。交联剂至少含有两个反应基团，它们靶向生物分子（例如蛋白质和核酸）中常见的特定功能基团。蛋白修饰试剂，比如聚乙二醇化或生物素化试剂，在其一个末端具有一个生物修饰基团（上述两种试剂分别为PEG链或生物素），在其另一端具有活性的化学反应基团。常见的用作生物偶联靶标（生物大分子）的功能基团包括伯胺、巯基、羰基、碳水化合物以及羧酸（图1，表1）。也可使用光反应基团进行无选择性的偶联。6H2NOHONH2H2NOHOHSLysineCysteineHN