杜绝非洲猪瘟检测中的假阴性周茜扬州大学.pdf

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1、123假阴性对猪场的利润损害假阴性对猪场的利润损害假阴性导致实际损失：高达高达648648万万保育猪拔点损失按2021年11月猪价计算规模均重保育猪数量（30kg/头）实际损失=体重*成本*数量（万）整个工段（24个单元）14400648一个排栋（8个单元）4800216一个批次（2个单元）1200162一个单元60027一个圈栏251.125成本15元/头01002003004005006007000200040006000800010000120001400016000整个工段（24个单元）一个排栋（8个单元）一个批次（2个单元）一个单元一个圈栏年出栏10万生长场保育猪拔点损失按2021年

2、11月猪价计算均重保育猪数量（30kg/头）实际损失=体重*成本*数量（万）黄金期：黄金期：1.1251.125万万白银期：白银期：2727万万破铜期：破铜期：162162万万烂铁期：烂铁期：216216万万烂铁期：烂铁期：648648万万02004006008001000120014001600020000400006000080000100000120000140000160000整个工段（24个单元）一个排栋（8个单元）一个批次（2个单元）一个单元一个圈栏年出栏10万生长场保育猪拔点损失按2021年11月猪价计算均重保育猪数量（110kg/头）机会利润损失=体重*成本*数量（万）烂铁期：

3、烂铁期：14261426万万烂铁期：烂铁期：238238万万破铜期：破铜期：119119万万白银期：白银期：5959万万黄金期：黄金期：2.52.5万万假阴性对猪场的利润损害假阴性对猪场的利润损害假阴性导致机会利润损失：高达高达14261426万万保育猪拔点损失按2021年11月猪价计算规模均重保育猪数量（110kg/头）机会利润损失=体重*成本*数量（万）整个工段（24个单元）1440001426一个排栋（8个单元）4800238一个批次（2个单元）1200119一个单元60059一个圈栏252.5成本15元/头假阴性的原因之一：样品的采集、处理不当假阴性的原因之一：样品的采集、处理不当采样

4、方案采样方案保证采得到保证采得到如何优化？如何优化？影响影响采样的因素采样的因素监控位点众多采样对象采样类型采样时机采样频率.环境样品猪群样品.拭子样、鼻拭子、口腔液、深咽拭子血样、前腔静脉血、尾根血、脐带血组织样、胎盘、淋巴结、肺脏.业务发生前后、转群业务、免疫前后、销售/拉死猪异常采样、紧急处置.日监控、周监控、月度监控、季度监控根据风险等级制定监控方案.人员、猪流、饲料、空气、类尿猪舍、鼠害、疫病、投毒、精液蚊蝇虫、飞鸟、车辆、水源、物资.假阴性的原因之一：样品的采集、处理不当假阴性的原因之一：样品的采集、处理不当环境30cm*30cm大纱布，提前打湿纱布，保证采样面积的覆盖度。猪样异常

5、猪鼻咽拭子采样异常猪鼻咽拭子采样+口腔液采样口腔液采样1、依赖一线员工对异常猪的识别能力2、排毒早期不表现症状3、频繁进圈采样存在传播风险异常猪定向采样1、异常猪不咬棉绳1、可实现整圈采样，采样效率高2、可以减少进圈频次误区：组织太粘稠，影响提取效率；全血上样，溶血严重，影响反应效率注：高温-血凝；血细胞破裂-释放抑制物；病毒核破坏细胞-核酸释放于血清中混样标准混样标准单个样本单个样本总体积总体积上样前处理方法上样前处理方法 唾液唾液&鼻液鼻液30混120ul不超过600ul7000r/min，30-60秒秒 粪便粪便7000r/min，30-60秒秒 组织研磨液组织研磨液7000r/min，

6、2分钟分钟 环境样品环境样品7000r/min，30-60秒秒 种猪精液种猪精液反复冻融反复冻融3次，次，7000r/min，30-60秒秒 血浆血浆&血清血清30混120ul7000r/min，30-60秒秒 获取操作手册假阴性的原因之二：假阴性的原因之二：检测试剂的灵敏度不够、检测方案不合理检测试剂的灵敏度不够、检测方案不合理试剂样品MAOPAqPCR稀释倍数自动阈值自动Ct荧光结果Tm/Ct值荧光结果110倍稀释模拟混样60.7517.94+82.2623.4+210倍稀样模拟混样57.6217.58+82.1923.5+35-1 倍稀释50.05