非洲猪瘟以及猪冠状病毒现场快速检测技术研究刘斐南京农业大学.pdf

1、非洲猪瘟以及猪冠状病毒现场快速检测技术研究报告人：刘 斐南京农业大学 动物医学院单分子纳米生物学实验室第十一届李曼中国养猪大会.非洲猪瘟、猪冠状病毒流行现状及诊断非洲猪瘟流行现状。非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员，可感染各个年龄段的猪只，其中以强毒力毒株感染引起的高出血性和高致死率为特征，致死率可高达100%。ASF的高传染性、高发病率和高死亡率，给我国乃至世界养猪业造成了巨大的经济威胁。2018年-2019年，全球共销毁约3000万头猪，直接经济损失高达20亿美元。至今，ASFV依然在全球范围内传播。猪冠状病毒流行现状 冠状

2、病毒是引起仔猪腹泻的重要病原，主要包括猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(Porcine delta coronavirus，PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus，SADS-CoV)。各种年龄猪都可发病，尤其是 310 日龄仔猪最易发病。感染猪均以呕吐、腹泻、脱水和肠道出血为主要特征，且常常呈现隐性感染或多病原混合

3、感染，给世界各地的养猪业均造成了巨大威胁。PEDV和TGEV是目前分布最广的猪腹泻病毒性病原，对哺乳仔猪致死率可达100%；在河南地区猪腹泻样本中，PDCoV阳性率达35.06%，与PEDV混合感染率达24.03%；SADS-CoV在2016年于我国广东首次发现。仅2017年引起国内猪只死亡数达25000头。检测方法应用场景什么时候检测抗体，什么时候检测抗原？非洲猪瘟 or 猪冠状病毒如何检测？检测方法应用场景 非洲猪瘟以及猪冠状病毒的准确、快速诊断对于防止疫病的蔓延，快速扑灭和根除尤为重要。病毒感染7-10天后可以检测到抗体，但通常急性的感染在猪只还未表现出明显症状时，就已死亡，首选核酸检测

4、。病原学诊断：依赖于活病毒、抗原、基因组的检测，包括病毒分离，抗原ELISA，荧光抗体检测，PCR等，目前荧光定量PCR检测使用较多。血清学诊断：猪感染非洲猪瘟以及猪冠状病毒后7-10天可出现抗体，而且抗体可以持续很长时间，因为目前没有ASF、PDCoV以及SADS-CoV疫苗，此方法针对亚急性和慢性的感染，适合大规模的抗体筛查。目前常用检测技术及优缺点检测方法优势缺点病原学检测病毒的分离与鉴定准确性强，可靠性高，可为后续深入研究病原特性提供重要材料耗时长，不适用于临床上对病原的快速检测。电镜观察该方法精确度高、快速、灵敏需通过特殊的电镜仪器，造价昂贵，不适用于大批量的样本检测免疫学诊断血清中

5、和实验操作简单、检测快速，适用于大批量样本检测抗体间存在交叉反应，特异性不强，且不适用于早期诊断免疫荧光可定性、定位、定量分析，可研究病原在组织细胞中的动态分布耗时长，对实验室及操作人员技术要求高，不适用于临床样本检测酶联免疫吸附实验灵敏度高、特异性强，稳定性号，诊断快速，适用于大量样本容易产生交叉反应，造成误检，具有滞后性分子生物学诊断qPCR/RT-PCR快速，灵敏，准确，特异性高，可定性和定量，可用于早期检测需要专业仪器，专业人员操作，对引物要求高，荧光染料成本高等温扩增技术操作简便、敏感性好，特异性高，诊断快速费用昂贵，易产生气溶胶污染现场检测的意义 目前，猪病实验室诊断技术虽然能够提

6、供精确的检测结果，但需要多种仪器设备，操作也比较复杂，依赖专业技术人员在实验室里才能完成，难以适应病原快速诊断的发展要求。快速诊断技术无需特殊仪器设备可肉眼判读结果，具有简便快速、特异性强、敏感性高，实验结果易保存等优点，并且可以定性或半定量检测。同时快速诊断技术对试验设备要求低，便于在基层养殖场实施，为基层兽医人员和猪场检测猪病的抗体、抗原提供便捷的检测手段。随着快速诊断技术的不断研究、发展及推广应用，将有效地促进猪重大疫病的检测与净化工作，对提高我国养猪业生产的整体技术水平和公共卫生安全，发挥巨大经济与社会效益。.冠状病毒快检方法的研究进展猪冠状病毒现场快速诊断的研究CRISPR-Cas1