1、层析介质寿命和清洁验证综合设计的良好实践2目 录引言层析介质寿命、清洁和保存验证的综合设计层析介质清洁程序的开发污染物与清洁工艺试剂清洁工艺参数的研究清洁工艺的放大层析介质缩小模型的寿命和清洁验证缩小模型的构建与确认层析介质寿命验证的设计层析介质缩小模型的清洁验证的设计层析介质寿命和清洁验证综合设计案例层析介质商业化规模的清洁验证商业化规模清洁验证的方法分析方法和可接受标准商业化规模清洁验证案例层析介质寿命和清洁的持续确认持续监控和维持变更控制层析介质的保存验证散装条件下的层析介质保存验证装柱条件下的层析介质保存验证生产工艺的预防步骤工艺操作的预防步骤生产工艺中的污染物控制GMP 操作控制原材

2、料控制缓冲液配制的控制对供应商的要求合格的供应商具有充实的研究数据层析介质 CIP 稳定性数据污染物控制的数据保存溶液的抑菌和清除数据结论缩略语参考文献34455777811131414141516161616171718181818181920202021222323243引言在整个生物药物生产工艺中，层析介质是至关重要的原材料。层析介质对于实现生物制品的纯度、有效性以及安全性都非常重要，需要对其进行足够的控制以实现工艺性能和产品质量的一致性。对于生物药物工艺，大多数时候层析介质是特定于专用产品使用，但通常会选择多循环次数使用。从工艺经济性角度，如果能够使用层析介质至一定的循环次数，再使用新

3、的层析介质替换，可以很好的降低层析介质的成本。层析介质的多循环使用使得在生物药物的注册审评以及常规的生产检查中，层析介质成为监管机构关注的重点。FDA 早在 1997 年的“人用单克隆抗体产品的生产和分析考虑要点”中就要求必须要有预先设定的使用限值1。EMA 也在一项 CPMP 的声明中指出，大多数宿主细胞蛋白是利用层析柱来去除的，其选择性不仅仅取决于层析介质的质量，而且还涉及层析介质的重复使用、保存条件和清洁与消毒等2。中国药典三部的“人用重组单克隆抗体制品总论”中也提到需要验证纯化用材料（如色谱柱介质）的重复适用性的可接受性限度3。尽管众多法规对层析介质的寿命、清洁和保存都提出了要求，但近

4、几年的 FDA 483 表格还是有不少针对层析介质验证的审查评论（表 1-1）4。层析介质验证的问题在各种会议上持续的被讨论，以及在监管机构的许可审评和常规检查中不断的被质疑，这并不令人惊讶，不过究其原因还是验证数据是否充分的问题，这也凸显了层析介质验证设计的重要性。表 1-1：美国 FDA 关于层析介质寿命和清洁验证的审查意见层析纯化层析柱的消毒和保存尚未完成验证缺少纯化层析柱在整个寿命期间的清洁验证数据没有研究数据支持层析柱两次使用之间的保存层析柱系统的清洁验证不充分，因为缺少对内毒素和微生物限度的评估不能确定清洁程序是否基于验证过的分析方法没有用于支持层析柱清洁的验证数据本文将从现有的法

5、规要求和生物药物开发实践出发，提出层析介质寿命和清洁验证的一种综合设计，可以满足产品和工艺需求以及监管机构的期望，并实现优异的工艺经济性。4层析介质寿命、清洁和保存验证的综合设计层析介质的寿命验证是证明层析介质在其预期使用时间期限内能够维持其可接受的性能特征，并且可持续的生产出符合预期质量标准的产品。层析介质的寿命验证一般在缩小模型上进行。层析介质的清洁验证则主要是证明清洁程序能够将层析介质的批次使用之间残留物的量最小化。层析介质清洁程序的开发一般在缩小模型上进行，而清洁程序的验证则需要综合使用缩小模型和商业化规模。层析介质的清洁程序还应包括保存步骤，PDA 技术报告 60-3 号曾明确指出应

6、证明层析介质在预期寿命内的维持其性能特征所需要的保存时间和保存条件6。另外，保存溶液的抑菌和抑真菌作用应成为这些研究的一部分。有效的清洁程序往往是层析介质的稳定性与清洁有效性之间的平衡。因此，层析介质的清洁程序同时还影响了层析介质的寿命，需要对寿命验证、清洁和保存验证进行综合设计。PDA 在其 14 号和 60-3 号技术报告中都支持层析介质的寿命验证与清洁验证可以并行进行5,6。结合法规要求、生物药物开发的实践要求，建议的层析介质寿命和清洁验证的程序步骤应包括：层析介质清洁程序的开发 层析介质缩小模型的寿命和清洁验证 层析介质商业化规模的清洁确认 层析介质寿命和清洁的持续确认 层析介质的保存